免疫印跡（Western Blot）
免疫印跡（Western Blot）是一個(gè)用于蛋白質(zhì)分析的常規(guī)技術(shù)，根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法，用于檢測(cè)經(jīng)電泳或斑點(diǎn)雜交后固定于膜上的蛋白質(zhì)的檢測(cè), 從而定量或定性的確定正常或?qū)嶒?yàn)條件下細(xì)胞或組織中目標(biāo)蛋白的表達(dá)情況。此外, 還可用于蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后續(xù)分析，作為一種廉價(jià)、便捷、可靠的研究工具。
影響免疫印跡成敗的一個(gè)主要因素是抗原分子中可被抗體識(shí)別的表位性質(zhì)。因?yàn)樯婕暗娇乖瓨悠返淖冃?，只有那些識(shí)別耐變性表位的抗體可以與抗原結(jié)合。多數(shù)多克隆抗體中或多或少含有這種類型的抗體，所以在免疫印跡中常選用多克隆抗體。第二個(gè)影響因素是蛋白原液中抗原的濃度。一些表達(dá)量低的蛋白在免疫印跡前常需要通過免疫沉淀，亞細(xì)胞分離等手段富集。第三影響因素是檢測(cè)體系中的各種試劑?？贵w與抗原結(jié)合后，再加酶標(biāo)二抗則形成抗原、一抗和酶標(biāo)二抗的三元復(fù)合物。選擇一種恰當(dāng)?shù)牡孜锱c三元復(fù)合物孵育，最終顯色形成肉眼可見的沉淀線或發(fā)光后由X光片或CCD采集到光信號(hào)。特異、穩(wěn)定的液態(tài)酶標(biāo)抗體和相應(yīng)的底物，保證了快速、準(zhǔn)確、靈敏的檢測(cè)。
我公司經(jīng)過不斷的優(yōu)化和改進(jìn)，積累了大量的經(jīng)驗(yàn)，并選用了目前市場(chǎng)上質(zhì)量與口碑最好的NC 膜和化學(xué)發(fā)光底物，為您提供高效、靈敏、穩(wěn)定的全套免疫印跡(western blot)技術(shù)服務(wù)。
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服務(wù)編號(hào)：YKSO-008
服務(wù)內(nèi)容：
檢測(cè)組織/細(xì)胞在不同狀態(tài)下目的基因表達(dá)差異，包括：從細(xì)胞或特定組織中提取總蛋白質(zhì)；用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離復(fù)雜蛋白樣品；轉(zhuǎn)膜；雜交：鑒定膜上的特定蛋白；顯色或顯影（化學(xué)發(fā)光法）。
1. Western實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，與客戶溝通認(rèn)可后執(zhí)行
2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)完成Western實(shí)驗(yàn)
樣品要求：
A.樣品包括細(xì)胞或組織的裂解液，裂解液濃度須大于2mg/ml，每張膜需要裂解液500ug
或提供下列材料：組織： 200-400mg ；細(xì)胞：約 10 7 細(xì)胞；蛋白： 1mg
B. 抗體：
a. 您提供符合技術(shù)要求的濃縮或即用型一抗；
b. 我們也可以為您代購抗體或者定制抗體（詳細(xì)情況請(qǐng)見抗體定制服務(wù)）
實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)：
內(nèi)參抗體或Tag抗體條帶清晰，位置正確.
交付材料：
詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)報(bào)告
