抗體純化
制備高特異性、高效價(jià)的抗體是實(shí)驗(yàn)免疫學(xué)技術(shù)的基礎(chǔ),抗體質(zhì)量的高低將直接影響試驗(yàn)的成敗。多克隆血清中含有復(fù)雜多樣的抗體,它不僅含有針對(duì)免疫原產(chǎn)生的抗體,還有血清的全部抗體,此外還含有許多自身的血清蛋白。為了獲得成分相對(duì)單一的抗體或?qū)⒖贵w用于特定的用途,就需要對(duì)抗體進(jìn)行純化處理。
純化抗體的用途之一是降低非特異性本底,能去除引起實(shí)驗(yàn)誤差的污染蛋白,且能精確控制實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生陽(yáng)性信號(hào)的抗體量, 因此純化抗體可以作為所有免疫化學(xué)實(shí)驗(yàn)中降低本底的基本手段。另外,使用純化抗體還能進(jìn)行抗體標(biāo)記(減少有時(shí)使用標(biāo)記二抗帶來(lái)的干擾),或用于制備免疫親和純化柱等。
抗體純化的方法包括DEAE離子交換色譜法、硫酸銨沉淀法及其他方法,其中蛋白G或蛋白A親和柱法純化較為簡(jiǎn)單、高效,抗原親和柱法純化則能獲得針對(duì)抗原的特異性抗體。
我公司擁有一流的抗體技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì),可為客戶提供多種抗體純化服務(wù),如硫酸銨純化、Protein A/G純化、抗原親和純化等,幫助客戶解決各種抗體純化問(wèn)題。
抗體純化(ProteinA/G法)
服務(wù)編號(hào):YKSO-3002
服務(wù)內(nèi)容:
1.Protein A/G 純化(≤50 ml)
2.紫外吸收法測(cè)定抗體濃度
3.純化抗體Elisa
最終交付的材料:
純化后抗體;SDS-PAGE抗體純度鑒定報(bào)告;ELISA檢測(cè)報(bào)告;完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
樣品要求:
抗血清,0.2mg 抗原
注:
1. 蛋白A或蛋白G是細(xì)菌胞壁蛋白,它們能結(jié)合抗體Fc段,這一結(jié)合非常牢固,但其親和力對(duì)pH的變化敏感,抗體/蛋白A或蛋白G的親和力隨PH值的降低而急劇降低,因而可用于純化不同來(lái)源的抗體和抗體亞型。
2. 在抗血清中免疫球蛋白IgG的含量為8-12 mg/ml,只占血清中總蛋白含量的10%左右。蛋白A/G純化抗體的得率大約為5-10 mg總IgG/ml 抗血清;
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